叶文雨¹ , 陈四妙¹ , 陈晓¹ , 林艺娟² , 汪洋² , 余文英¹ , 鲁国东² , 陈继圣¹ , 王宗华¹

1 福建农林大学生命学院, 福州, 350002;
2 福建农林大学植物保护学院, 福州, 350002
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2013 年, 第 11卷, 第 8 篇   doi: 10.3969/mpb.011.000719
收稿日期: 2013年09月18日    接受日期: 2013年10月10日    发表日期: 2013年10月23日

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Rho族蛋白是重要的分子开关，受GTP酶激活蛋白(GAP)调控。MGG_09303在稻瘟病菌中编码一个假定的Rho GTP酶激活蛋白。为探讨其与Rho族蛋白的互作关系，本文首先将基因MGG_09303与酵母中RhoGAPs蛋白序列进行多重比对，结果表明MGG_09303与酿酒酵母中的RhoGAP蛋白的氨基酸同源性较高的有BEM3 (29%)、BEM2 (28%)、LRG1 (27%)，而相似性较高的有RGD2 (53%)、LRG1 (52%)，还发现MGG_09303与酿酒酵母中的RhoGAP具有共同的保守的精氨酸。据此初步预测它有可能与Rho1和Rho3存在互作，本研究构建了pGADT7-MGG_09303捕获表达载体，利用酵母双杂交技术将捕获载体pGADT7-MGG_09303分别与Rho族蛋白持续激活态(CA)和失活态(DN)诱饵载体共转AH109酵母细胞，进行双杂交实验。结果表明，MGG_09303蛋白与Rho1和Rho3的持续激活态(CA)互作，而不与其负显性失活态(DN)互作，研究结果验证了预测的结果，为进一步研究RhoGAP蛋白对Rho族蛋白负调控的分子机制奠定了重要的基础。

稻瘟病菌；酿酒酵母；Rho GAP；序列比对；酵母双杂交；Rho族蛋白；相互作用